• <samp id="mypgk"><strong id="mypgk"><xmp id="mypgk"></xmp></strong></samp>
      <td id="mypgk"></td>
      <pre id="mypgk"><del id="mypgk"><xmp id="mypgk"></xmp></del></pre>
      1. <big id="mypgk"><strike id="mypgk"></strike></big>
        <td id="mypgk"><option id="mypgk"></option></td>

          <td id="mypgk"><ruby id="mypgk"></ruby></td>
          您好,歡迎進入上海紀寧實業有限公司網站!
          一鍵分享網站到:
          您現在的位置:首頁 >> 技術文章 >> 淺談懸浮細胞培養的正確方法
          淺談懸浮細胞培養的正確方法
          瀏覽次數:430發布日期:2023-01-11

          做料研實驗需要耐心和細心,一個不小心,實驗結果就會出現很大的偏差, 上周有朋友們向我們咨詢暴浮細胞培養的正確方法,上海紀寧生物技術員為大家整理了懸浮細胞培養的步驟, 一起來學習下吧。


          一.材料與儀器

          1.凍存HeLa S3細胞

          70%乙醇MEM-10/ EDTA

          旋轉瓶培養基5 25 cm2組織培養瓶C02培養箱Sorvall H-6000A轉子100 ml或200 ml通氣旋轉瓶和帶濾膜的瓶蓋.


          二、步驟

          1.將含有凍存HeLa S3細胞的安瓿放入379C水浴中解凍。


          2.用70%乙醇對安瓿的頂端進行消毒,打開安瓿,用吸管將細胞轉移到含有5 ml MEM-10 培養基的25 cm2組織培養瓶中,輕輕搖動培養瓶,使細胞均勻分布于培養瓶中,放入5% CO2加濕培養箱中37°C培養過夜。


          3.將培養基吸出,用0.5 ml 37%C的/EDTA覆蓋細胞,消化30~40 s。


          4.加入10 ml旋轉瓶培養基.5 ,并將細胞轉移至50 ml的離心管中。室溫1800g離心5min,棄上清。


          5.將細胞沉淀懸浮在5 ml的旋轉瓶培養基5中,上下吹打,將細胞團打散。


          6.在100 ml或200 ml通氣旋轉瓶中加入50 ml旋轉瓶培養基-5 ,并將細胞懸液轉移到瓶中。


          7.取出1 ml細胞懸液,用血細胞計數器(附錄3F)進行細胞計數。加入適量的旋轉瓶培養基5 ,使細胞密度為(3~4) x 105細胞/ml。將細胞放入無CO2培養箱, 37°C旋轉培養。


          8.隨后的兩天讓細胞繼續生長,并且每天對細胞進行計數,加入適量的旋轉瓶培養基-5以維持( 3~4) x105細胞/ml的細胞密度。


          9.取1 ml的細胞懸液,用血細胞計數器對細胞進行監測。


          10.當細胞密度達到(4~5) x105細胞/ml時,隔天或每天用培養基將細胞稀釋至1.5x105或2.5x105細胞/ml.


          11.分別將裝有50 ml或100 ml細胞懸液的100 ml或200 ml通氣旋轉瓶放入37°C無CO2培養箱旋轉培養。每天或隔天傳代。


          上海紀寧實業有限公司位于中國*大城市——中華人民共和國直轄市之一的上海,已發展成集科研、生產、銷售為一體的創新性企業。公司專注于生物、生化領域產品銷售,主要經營的有ELISA試劑盒、生化試劑、抗體、標準品、對照品、細胞、血清、培養基等生化產品。


          以上是淺談懸浮細胞培養的正確方法,你知道了嗎?

            QQ在線客服
          •   在線咨詢
          • 點擊這里給我發消息
          電話
          021-54845833
          手機
          13524933993
          97超超超碰国产精品|欧美日韩中文一区|精品久久久久久久久国产字幕|9l最新国产新拍社区入口|精品一卡2卡三卡4卡免费网站在线
        1. <samp id="mypgk"><strong id="mypgk"><xmp id="mypgk"></xmp></strong></samp>
            <td id="mypgk"></td>
            <pre id="mypgk"><del id="mypgk"><xmp id="mypgk"></xmp></del></pre>
            1. <big id="mypgk"><strike id="mypgk"></strike></big>
              <td id="mypgk"><option id="mypgk"></option></td>

                <td id="mypgk"><ruby id="mypgk"></ruby></td>