(輔酶Ⅰ系列)甲醛脫氫酶(FDH)測試盒

測定方法：微量法

產品規格：100管/96樣

注    意：正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義：

甲醛是一種能與蛋白質、核酸和脂類產生非特異性反應的活潑化合物，對所有生物都具有很高毒性。甲醛脫氫酶作為含鋅中等鏈醇脫氫酶（ADH）的家庭成員之一，廣泛存在于原核和真核生物中，該酶能利用NAD+作為輔酶，將有毒的甲醛氧化，是甲醛氧化途徑中的關鍵酶。

(輔酶Ⅰ系列)甲醛脫氫酶(FDH)測試盒

測定原理：

甲醛脫氫酶催化甲醛和NAD+產生NADH，在340nm處的吸光值會增加，測定340nm處的吸光值變化，可計算得到甲醛脫氫酶的活性。

自備實驗用品及儀器：

天平、離心機、酶標儀、96孔板、蒸餾水。

試劑組成和配制：

提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存。

試劑一：液體15mL×1瓶，4℃保存。

試劑二：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨用前加入6mL水溶解待用，用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。

試劑三：粉劑×1支，4℃保存；臨用前加入1.5mL水溶解待用。

試劑四：液體1.5mL×1支，4℃避光保存。

FDH酶活計算：

（1）按蛋白濃度計算

酶活定義：每毫克蛋白每分鐘催化還原1nmol NAD+的酶量為1個酶活單位。

FDH酶活（nmol/min/mg prot）= ×V反總÷（V樣×Cpr）÷T = 643×△A÷Cpr

（2）按樣本質量計算

酶活定義：每克樣品每分鐘催化還原1nmol NAD+的酶量為1個酶活單位。

FDH酶活（nmol/min/g 鮮重）= ×V反總÷（V樣×W÷V樣總）÷T =643×△A÷W

（3）按照細胞數量計算

酶活定義：每104個細胞每分鐘催化還原1nmol NAD+的酶量為1個酶活單位。

FDH酶活（nmol/min/104cell）= ×V反總÷（V樣÷V樣總×細胞數量（萬個））÷T= 643×△A÷細胞數量

（4）按液體體積計算

酶活定義：每mL樣本每分鐘催化還原1nmol NAD+的酶量為1個酶活單位。

FDH酶活（nmol/min/mL）= ×V反總÷V樣÷T=643×△A

：NADH微摩爾消光系數，6.22×10-3 L/µmol/cm；d：96孔板光徑，0.5cm；V反總：反應體系總體積，0.2mL；V樣：反應體系中樣本體積，0.02mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；T，反應時間，5min；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質量，g