雙縮脲法蛋白含量測試盒_蛋白-含量系列

測定方法：分光光度法

產品規格：50管/48樣

注   意 ： 正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定，確保蛋白濃度在1～10mg/ml范圍內。

測定意義：

樣品可溶性蛋白質含量常常用于酶活性計算。此外，可溶性蛋白質含量也用于食品等質量分析。

雙縮脲法蛋白含量測試盒_蛋白-含量系列

測定原理：

強堿性溶液中，雙縮脲與CuSO4形成紫色絡合物；紫色絡合物顏色的深淺與蛋白質濃度成正比，而與蛋白質分子量及氨基酸成分無關，故可用來測定蛋白質含量。該方法測定范圍為1~10mg蛋白質，適用于蛋白質濃度高的樣品，尤其是動物材料。

自備儀器和用品：

離心機、可見分光光度計、移液器、1 mL玻璃比色皿和蒸餾水。

試劑組成和配制：

試劑一：液體50mL×1瓶，4℃保存。

標準品：液體1mL×1瓶，5 mg/mL，4℃保存。

樣品中可溶性蛋白質提?。?br/>

1.液體樣品：澄清無色液體樣品可以直接測定。

2.組織樣品：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液（自備，根據需要選用酶提取緩沖液或者蒸餾水或者生理鹽水））

冰浴勻漿，8000g，4℃離心10min，取上清，即待測液。（動物樣品常常需要稀釋）

3.細菌、真菌：按照細胞數量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后8000g，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測。

測定操作：

1. 分光光度計預熱30 min，調節波長到540 nm，蒸餾水調零。

2. 空白管：取1 mL玻璃比色皿，加入200μL蒸餾水，1000μL試劑一，混勻后室溫靜置15 min，于540nm比色，記為A空白管。

3. 標準管：取1 mL玻璃比色皿，加入200μL標準液，1000μL試劑一，混勻后室溫靜置15 min，于540 nm比色，記為A標準管。

4. 測定管：取1 mL玻璃比色皿，加入200μL待測液，1000μL試劑一，混勻后室溫靜置15 min，于540nm比色，記為A測定管。

注意：空白管和標準管只需測定一次。